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HEK293病毒包装套装(LV/AAV专用)

产品介绍

    HEK293病毒包装套装(LV/AAV专用)

    一、简介 

    宥艺生物 HEK293 瞬转表达基础培养基(Basal Medium)与补料培养基(Feed Medium是完全化学成分限定(Chemically Defined),均不含血清、水解物及任何动物来源的成分, 适合于不同亚型 HEK293 细胞的高密度悬浮培养,可实现病毒载体的高水平表达:AAV 达到 11 次方/mLLV 达到 7 次方/mL。 

    宥艺生物 HEK293 培养基已完成美国 DMF 登记(DMF039790),更有力的支持客户需求。 

    二、产品描述 

    1 HEK293 细胞培养基产品描述


    三、产品运输及存储 

    运输:常温或冷链运输; 存储:2~8℃,干燥、避光保存; 

    有效期:基础培养基干粉:2 年;

    基础培养基液体:1 年; 

    补料培养基干粉:2 年; 

    补料培养基液体:1 年(开封后建议在 3 个月内使用完)。 

    四、应用范围 

    宥艺生物培养基可用于 HEK293 细胞冻存、复苏、传代、高密度强化工艺培养及灌流培养,可 实现细胞快速生长,维持细胞高活率及蛋白该表达。 

    五、使用指南 细胞冻存 

    1.准备处于对数生长期状态较好的细胞,且细胞活率在 90%以上; 

    2.检测活细胞密度,计算所需的冻存培养基体积,计算最终细胞密度 1~1.5×10 7 cells/mL; 

    3.准备好所需的冻存培养基:90%基础培养基+10% DMSO2~8℃冷藏保存; 

    4.设置离心力 200×g,离心 5 min,用冻存培养基重新悬浮细胞至冻存体积; 

    5.将悬浮细胞等分保存至适宜规格的细胞冻存管中; 

    6.将细胞冻存管置于程序降温盒中,按照降温标准进行降温; 

    7.将细胞转移到液氮罐中保存。 

    细胞复苏 

    1.提前打开水浴锅,并设置温度至 36.5℃~37.0℃; 

    2.将细胞从液氮罐中移出后,快速在水浴锅中融化冷冻的细胞(<3 min); 

    3.将冷冻管中的细胞液全部转移到 125 mL 含有 30 mL 预温过的基础培养基的摇瓶中; 

    4.置于 36.5~37.0℃5~8% CO2,转速 120 rpm(轨道振幅 50 mm)的摇床中培养; 

    5.细胞至少传代 2 次,待细胞完全复苏且活率在 90%以上,可按计划进行后续操作。 

    细胞传代 

    1.将基础培养基放入 36.5~37.0℃条件下预热 20 min; 

    2.检测活细胞密度,按接种密度为 0.3×10 6 cells/mL 的最终传代体积,计算所需种子液量; 

    3.无菌转移所需量的种子液,添加至含所需体积的已预热的基础培养基的摇瓶中; 

    4.将摇瓶放入温度 36.5~37.0℃120 rpm(振幅 50 mm)(摇瓶底面积增大,需减小摇床转速), 5%~8% CO2的细胞培养摇床中进行培养; 

    5.每 3 天用新鲜的培养基按上述步骤进行传代培养。

    六、测试数据

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